本技术属于蛋白质纯化填料制备技术领域,特别涉及黄原胶微球填料的制备方法及其应用。该黄原胶基微球由聚乙烯醇与黄原胶按质量比(1:1-1:4)混合制成,具有绿色环保、无毒、可降解和良好的生物相容性。制备出的微球粒径均匀,表面光滑,且原料黄原胶成本低廉,性能稳定。
背景技术
天然多糖具有良好的亲水性和生物相容性,能够维持蛋白的构相,保持蛋白的活性。多糖基质的蛋白纯化填料是目前蛋白质分离纯化工业使用的最主要的填料之一。
黄原胶(XG)是一种价格低廉,性能优良的生物高分子酸性杂多糖,含有纤维素骨架和三糖侧链,是集增稠、悬浮、乳化、稳定于一体,性能较为优越的生物胶。以其为原料所制备的水凝胶亲水性强、无毒、可降解、生物相容性好,常作高吸水性树脂、药物载体和微胶囊等,在生物领域具有广阔的应用前景。
随着近年国内生物医药行业和体外诊断等行业的快速发展,蛋白纯化填料的市场需求也随着变大。当前生物医药的迅速发展,人们对蛋白类药物的需求量日益增长,同时也对蛋白分离纯化的技术提出了挑战。快速、高效的分离纯化技术是必然的发展需求。其中蛋白纯化是生物药生产的核心环节,决定产品的质量,也决定着整个下游生产成本的高低。
层析技术是生物大分子分离纯化最有效的手段之一,可以实现很高的分离度,其中离子交换层析的应用最为广泛。对于离子交换层析,目标蛋白质与介质间的静电相互作用起主导作用,直接影响着蛋白质的分离纯化。近年来,离子交换层析技术已经广泛应用于蛋白质、酶、核酸、肤、寡核昔酸、病毒、噬菌体和多糖的分离和纯化。具有如下优点:(1)具有开放性支持骨架,大分子可以自由进入和迅速扩散,故吸附容量大。(2)具有亲水性,用温和条件就可以洗脱,不致引起蛋白质变性或酶的失活。(3)表面积大、交换容量大,回收率高,可用于分离和制备。
本项目将制备一种黄原胶微球填料,项目不仅能有效解决蛋白质纯化工艺瓶颈问题,可将未知得基因序列得野生菌进行纯化,也将为蛋白纯化乃至其它生物大分子高效纯化提供必要的理论前提和技术支持。
实现思路