本项发明涉及免疫球蛋白领域,特别揭示了一种能够识别并中和7种瘟病毒的广谱单克隆抗体。该抗体或其抗原结合片段具有特定的重链可变区序列(SEQ ID No.1),旨在提供一种有效的抗瘟病毒策略。
背景技术
瘟病毒是一类严重危害家畜及野生动物的病毒。其成员病毒粒子成球形,直径约为40-60 nm,有囊膜,为单股正链RNA病毒,基因组大小为11.3-13.0 kb,包含一个大的开放阅读框和基因组两端的非编码区,编码4种结构蛋白和8种非结构蛋白,其中结构蛋白Erns
(gp44/48)和E2(gp55)、非结构蛋白NS3可以刺激机体产生抗体,E2蛋白是瘟病毒的重要保护性抗原。猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2蛋白的氨基端有4个独立的抗原结构域,依次为B、C、D、A结构域,其进一步可以分为B/C抗原区和D/A抗原区,大部分抗原表位位于这2个抗原区上。
根据国际病毒分类委员会(ICTV)的最新报告,瘟病毒包含11个已知成员( Pestivirus
A - Pestivirus
K),除此之外,一些与已知成员有较大遗传差异的病毒如Batpestivirus、Pangolin pestivirus、Bamboo rat pestivirus、Linda pestivirus、Ovinepestivirus(OVPV)也被发现。部分成员分布广泛,严重威胁全球养殖业, Pestivirus
A(BVDV1)和 Pestivirus
B(BVDV2)可以感染牛、羊、猪等家畜以及鹿、和羚羊等野生动物,可以导致犊牛腹泻、粘膜脱落、流产、死胎和胎儿先天畸形; Pestivirus
C(CSFV)是严重危害养猪业的病原之一,病猪主要表现为高热稽留、呼吸困难、全身广泛性出血和繁殖障碍等; Pestivirus
D(BDV)的主要宿主是绵羊和山羊,感染BDV后,临床表现为流产、死胎、羔羊震颤、免疫抑制和多毛。 Pestivirus
H(HoBiPeV)主要感染牛和其他反刍动物,又称为BVDV3。此外与BDV遗传距离较远的瘟病毒 Pestivirus
I(AydinPeV)和OVPV也在羊群中被检测到,这两种新的瘟病毒与CSFV毒株的亲缘关系比BDV更近。除危害动物健康外,瘟病毒及其抗体也是牛血清产品的重要污染物,对生命科学研究和疫苗生产的健康发展造成了较大的损害。
目前仅鉴定出了少数可以识别多种瘟病毒成员的单抗,单抗m912可以与BDV和部分CSFV反应,单抗15C5能与绝大多数BVDV1、BVDV2、BVDV3、BDV和Bungowannah virus反应,NS3蛋白单抗C16也是瘟病毒广谱单抗,能与CSFV、BVDV1、BVDV2、BVDV3和BDV等瘟病毒反应,但这2株广谱单抗不具有中和能力。目前鉴定的瘟病毒单抗存在识别成员种类少、无中和能力等问题,极大地限制了这些单抗的应用。因此,亟需研究和开发能够特异性结合更多瘟病毒、具有中和作用的广谱中和抗体。
实现思路