本技术公开了一种Fel D1与Fel D4融合蛋白及其应用,本发明通过原核表达的方式获得了Fel D1与Fel D4融合蛋白,融合表达的蛋白在诱导蛋白表达、纯化、浓缩和免疫等方面大大简化了操作程序,降低了经济成本。本发明提供了一种卵黄抗体的制备方法,通过融合蛋白免疫蛋鸡获得的卵黄抗体可分别与Fel D1和Fel D4发生抗体‑抗原发应,并且效价高于单一抗原蛋白免疫组和联合免疫组。本发明还提供了一种功能性猫粮的制备方法,将蛋黄粉以一定比例添加到猫粮中,喂食一段时间后,猫毛发和唾液中的Fel D1和Fel D4含量显著降低,并且融合蛋白卵黄抗体制备的猫粮可同时抗Fel D1和Fel D4,并且阻断效果显著提高。
背景技术
全球范围内约有10%至20%的人群对猫过敏,过敏症状包括打喷嚏、流鼻涕、皮肤瘙痒和眼睛流泪等,严重时还可引起过敏性休克。频繁清洁卫生和长期服用抗过敏药物可减轻或防止过敏反应,通过重复注射递增剂量的粗猫皮屑提取物也可能有助于猫过敏患者脱敏,但这些方法耗时耗力。
当首次接触致敏原时,机体免疫细胞对过敏原进行加工、处理和记录。当机体再次接触同种过敏原时,肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的特异性IgE被激活,释放组胺等活性介质,作用于皮肤、呼吸道及消化道等组织器官,引起毛细血管扩张、黏液分泌和平滑肌收缩,最终导致鼻炎、哮喘,甚至过敏性休克等过敏反应。因此,阻断过敏原和IgE的相互作用是防治过敏反应关键环节。
随着分子生物学技术的发展,很多过敏原的分子结构已经确定。已经有8种猫过敏原分子被世界卫生组织(WHO)和国际免疫学会(IUIS)记录在过敏原数据库中,这些过敏原大多分布在唾液和皮屑里,在猫舔舐毛发或皮屑脱落时散播到毛发和环境中。Felis catus(domestic cat) allergen 1 (Fel D1) 是致敏活性最高的猫过敏原,可导致约93%的猫过敏患者产生过敏反应。Fel D4被人类IgE识别的频率和致敏活性仅次于Fel D1,可导致约63%的猫过敏患者产生过敏反应。因此,Fel D1和Fel D4是猫过敏患者防范过敏的重点。
实现思路