本技术提供了一种特异性定量标定白细胞介素7 (Interleukin‑7)活性的细胞系及其应用。具体地,本发明提供了一种构建体、载体、宿主细胞、试剂盒及其应用与制备方法,利用本发明的构建体、载体、宿主细胞、试剂盒可构建特异性定量标定白细胞介素7 (IL‑7)活性的IL‑7报告细胞,从而实现对IL‑7活性的稳定、高准确性、高灵敏度的定量检测,为IL‑7相关药物开发提供精确的质控手段。
背景技术
IL-7是IL-2超家族的成员之一,是一种多效细胞因子,广泛表达于骨髓、胸腺、淋巴结等淋巴器官和皮肤、肺、肝脏等非淋巴部位。IL-7可以由多种细胞产生,如胎肝细胞、骨髓中的基质细胞、胸腺细胞以及上皮细胞等。作为适应性免疫系统必需的细胞因子,IL-7在整个免疫系统细胞发育过程中发挥着至关重要的调节作用,可以影响B细胞、T细胞、NK细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和先天性淋巴细胞的发育、增殖及存活。
IL-7的作用机制是通过与其受体(IL-7Rα)结合,并招募IL-2Rγ形成三元信号复合物,激活下游的两个信号通路:JAK/STAT5和PI3K-AKT信号通路,激活相应基因的表达来行使其功能。
IL-7作为一种在人类免疫系统发育和维持中起着重要作用的分泌型细胞因子,有多种利用IL-7的治疗方法正在被开发。同时,也有多种将IL-7作为重要原材料的生物制品正在开发。所以如何高精度地检测和标定IL-7的生物活性就显得尤为重要,对其药物活力的储存稳定性的检测也是药物开发过程中至关重要的一步。
在现有技术中,针对细胞因子如IL-7活性的检测方法,由于病毒载体骨架上的LTR序列固有的转录起始活性造成报告基因的本底泄露性表达,这会极大程度地降低对目标细胞因子的检测准确性和灵敏性。因此,本领域需要开发一种高准确性、高灵敏度的定量标定IL-7活性的检测方法。
实现思路