本技术公开了一种BCG特异性保护抗体的分离及应用,本发明采用生物素链霉亲和素层析方法分离到BCG特异性抗体,并通过高效液相色谱分析抗体连接糖链,发现糖链混合物中,双半乳糖单/双唾液酸糖型百分比增加,这种抗体有助于杀灭结核分枝杆菌,为结核病免疫标志物和疫苗研发提供新的思路。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的一些理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
结核病是由结核分枝杆菌引起的传染病。我国新生儿出生均需要接种卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)以预防结核病,BCG是牛结核分枝杆菌的减毒株,在结核病高发地区,是唯一被世界卫生组织推荐使用的预防结核病的疫苗。
人体针对结核菌的感染既可以产生细胞免疫也可以产生体液免疫,因为结核分枝杆菌是胞内寄生菌,所以细胞免疫被认为是发挥主体保护作用的免疫应答,但是某些针对细胞免疫设计的疫苗效果却欠佳。近年来,体液免疫即抗体IgG的保护作用受到关注,如,结核分枝杆菌荚膜多糖特异性IgG在人体实验中显示出很好的抗结核作用,转运蛋白和脂蛋白特异性IgG能抵抗结核分枝杆菌的感染。荚膜多糖特异性IgG还能促进中性粒细胞杀灭结核分枝杆菌。IgG连接的糖链也影响抗体的保护作用,IgG Fc段第297位氨基酸天冬酰胺连接糖链,糖型有多种,基本结构为乙酰葡糖胺-乙酰葡糖胺-甘露糖-甘露糖-乙酰葡糖胺,糖链复合物中,如果末端含有双半乳糖唾液酸的糖链百分比高,可增强巨噬细胞对结核分枝杆菌的杀灭作用。图1显示分子量最大的糖型,即含双半乳糖双唾液酸糖型。
如前所述,由于我国新生儿普遍接种BCG,所以研究BCG接种后特异性抗体的保护作用具有重要的现实意义,可用于疫苗的研发中新免疫标志物的确立和生物制品制备,但是BCG特异性抗体分离和抗体连接糖型百分比率的鉴定是难题,国内外尚未见报道,这种特异性的抗体的保护作用国内外也未见专利申请和报道。
实现思路